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> Kit de conjugaison spécifique au site AGLink®
La méthode de conjugaison choisie pour les médicaments conjugués à base d'anticorps joue un rôle essentiel dans la détermination du rapport anticorps-médicament (DAR) et de l'uniformité du produit obtenu, ce qui a un impact direct sur son efficacité, sa tolérabilité et sa stabilité.
Les méthodes de conjugaison sont généralement classées comme étant aléatoires ou spécifiques à un site. La conjugaison spécifique à un site est de plus en plus privilégiée en raison de sa capacité à produire des médicaments conjugués présentant une grande uniformité et des profils de sécurité améliorés.
Presque tous les anticorps monoclonaux sont glycosylés à (ou autour de) l'Asn-297 du domaine Fc. La conjugaison médiée par les glycanes, une méthode bien établie et spécifique à un site, utilise les sites de glycosylation N297 de l'anticorps pour la conjugaison.
Comme il est éloigné de la région de liaison à l'antigène, la conjugaison à ce site préserve la fonction de liaison de l'anticorps, minimisant ainsi le risque de compromettre sa capacité de liaison à l'antigène après la conjugaison. Cette méthode élimine la nécessité de modifier l'ingénierie des anticorps, ce qui améliore la commodité, la polyvalence et accélère considérablement l'efficacité de la recherche de stade précoce.
En collaboration avec Glyco-Therapy Biotechnology Co, Ltd, nous avons développé le kit de conjugaison spécifique au site AGLink® DAR2&4. Basé sur la plateforme de conjugaison YTConju™ de Glyco-thérapy, le kit facilite la conjugaison efficace de diverses charges utiles, notamment la toxine (MMAE), les groupes fonctionnels réactifs (Tz/DBCO) et les étiquettes de détection (Biotine). Conçu pour faciliter la recherche et les expériences biologiques de stade précoce dans le domaine des médicaments conjugués.
Un seul pot, une seule étape
Kits DAR 2 ou DAR 4 disponibles avec un seul kit
Atteindre des valeurs uniformes DAR du jour au lendemain ou dans les 24 heures
Prêts pour la chimie click
Produits homogènes et stables après conjugaison
Différents types de kits de conjugaison à utiliser
For DAR4 Conjugation
For DAR2 Conjugation
Toxine
Groupe fonctionnel réactif
Label de détection
Conjugaison avec MMAE pour le criblage d'anticorps, la préparation et les études de performance dans le domaine des ADC.
HIC-HPLC analysis of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2)
The analysis of the antigen-binding capacity of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2), the results showing that binding to the HER2 antigen unaffected by the AGLink conjugation
Less than 5% of antibody aggregation by SEC-HPLC
MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2) are stable in human plasma in vitro
Validated in-vitro cell-killing activity of MMAE ADCs (DAR 4 & DAR 2)
DBCO: Le DBCO réagit avec les molécules contenant du N3 dans le cadre de la chimie Click, ce qui renforce l'hydrophilie des molécules modifiées.
Tétrazine : La tétrazine, réactive avec les groupes fonctionnels BCN ou TCO, présente une réactivité supérieure, ce qui la rend plus adaptée à la conjugaison de molécules complexes.
L'utilisation de réactions de chimie click permet la conjugaison d'une variété de groupements, y compris des toxines, des colorants fluorescents, des oligonucléotides, des nanocorps, et bien plus encore.
Criblage et préparation d'anticorps pour la détection ou le diagnostic
Des produits plus homogènes et une meilleure cohérence d'un lot à l'autre par rapport à l'étiquetage chimique traditionnel
| Molecule | Cat. No. | Product Description | Preorder/Order |
|---|---|---|---|
| MMAE | ADC-P005 | AGLink® ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR2&4, 1mg) | |
| Tetrazine | ADC-P006 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Tetrazine, DAR2&4, 1mg) | |
| DBCO | ADC-P007 | AGLink® ADC Conjugation Kit (DBCO, DAR2&4, 1mg) | |
| Biotin | ADC-P008 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Biotin, DAR2&4, 1mg) | |
| MMAE | ADC-P009 | AGLink® ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR2&4, 5mg) | |
| Tetrazine | ADC-P010 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Tetrazine, DAR2&4, 5mg) | |
| DBCO | ADC-P011 | AGLink® ADC Conjugation Kit (DBCO, DAR2&4, 5mg) | |
| Biotin | ADC-P012 | AGLink® ADC Conjugation Kit (Biotin, DAR2&4, 5mg) |
1. Quelle est la quantité minimale d'anticorps adaptée au kit de conjugaison AGLink ?
L'exigence minimale est de 200 μg, avec un taux de récupération attendu supérieur à 85 %. Pour tenir compte de cette quantité, réduire proportionnellement les réactifs selon le protocole fourni.
2. Est-il nécessaire de concentrer l'anticorps conformément au protocole ?
Pour une efficacité optimale de la réaction, il est recommandé de concentrer l'anticorps à la concentration suggérée par le protocole. Si la concentration n'est pas possible, veiller à ce que la concentration d'anticorps reste supérieure à 1 mg/ml et prolonger le temps de réaction à 48 heures pour maintenir l'efficacité de la conjugaison.
3. Ce kit de conjugaison convient-il aux anticorps de toutes les espèces ?
Ce kit de conjugaison est très efficace pour la conjugaison d'anticorps humanisés. Cependant, les anticorps murins et de lapin, en raison de leurs structures complexes et d'une validation incomplète, peuvent nécessiter un temps de conjugaison plus long, jusqu'à 48 heures, afin d'améliorer l'efficacité de la conjugaison.
4. Le linker du kit de conjugaison AGLink® ADC peut-il être hydrolysé et, dans l'affirmative, par quel moyen ?
Le linker du kit de conjugaison AGLink® ADC (MMAE, DAR 2 & 4, 1 mg & 5 mg) est le vc-PAB, qui peut être clivé par la cathepsine B. La clivabilité des linkers dans d'autres kits dépend de l'utilisation ou non d'un linker clivable lors de la conjugaison par chimie click.
5. Quelle est l'efficacité de conjugaison du kit de conjugaison et quelles sont les méthodes utilisées pour détecter le rapport médicament/anticorps (DAR) du produit conjugué ?
L'efficacité de conjugaison de ces kits peut dépasser 90 %, et la valeur DAR peut être analysée par HIC-HPLC (MMAE) ou LC-MS (MMAE/DBCO/Tétrazine/Biotine).
6. Comment conserver le produit conjugué et quelle est sa stabilité dans ces conditions ?
Il est recommandé de conserver le produit conjugué dans un tampon PBS, où il peut être conservé pendant plus de six mois à -80°C. Éviter les cycles répétés de congélation-décongélation.
7. Quel est l'environnement de laboratoire requis pour ce kit ?
Le kit de conjugaison AGLink® peut être utilisé dans des conditions normales de laboratoire. Veillez à utiliser un équipement de protection individuelle (blouse de laboratoire, lunettes de sécurité et gants en nitrile résistant aux produits chimiques) lorsque vous manipulez le MMAE.
8. Ce produit fait-il l'objet de restrictions en matière de brevets et cela aura-t-il un impact sur le développement des CMC et la production commerciale ?
La propriété intellectuelle de notre kit de conjugaison AGLink® est couverte en partie ou en totalité par un brevet détenu ou contrôlé par Glyco-therapy Biotechnology Co, Ltd. Pour plus d'informations sur les droits commerciaux, veuillez contacter inquiry@acrobiosystems.com pour tout commentaire ou préoccupation.
9. Si le site Fc N297 est muté, la conjugaison spécifique au site peut-elle encore être réalisée ?
Le kit de conjugaison actuel est conçu pour une modification spécifique des sites glycosylés. Si le site de glycosylation du Fc N297 est supprimé, ce kit ne peut pas être utilisé. Cependant, la conjugaison spécifique à un site peut être réalisée à l'aide d'autres méthodes.
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