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Solutions pour l’évaluation de l’expression des CAR


Protéines marquées par fluorescence
Fluorescence-labeled Proteins
Protéines biotinylées
Biotinylated Proteins
Protéines non conjuguées
Unconjugated Proteins

La thérapie cellulaire du récepteur de l'antigène chimérique T (CAR-T) est un nouveau traitement pour une variété de cancers. L'idée est de prélever les lymphocytes T du patient et de modifier génétiquement les cellules pour qu'elles expriment un récepteur antigénique chimérique (CAR) qui reconnaît un antigène spécifique associé à la tumeur (TAA). En conséquence, les cellules T exprimant un CAR, lorsqu'elles sont réintroduites dans le corps du patient, cibleront et élimineront les cellules tumorales exprimant un TAA.

L'évaluation de l'expression des CAR est une étape essentielle dans la production de cellules CAR-T. Cela se fait souvent par cytométrie en flux, en utilisant la protéine L, des anticorps anti-Fab ou des antigènes cibles comme méthodes de détection. Parmi ces choix courants, les antigènes cibles sont largement considérés comme la meilleure option, car ils offrent une spécificité élevée et une coloration de fond minimale.

ACROBiosystems a développé une vaste collection de protéines recombinantes pour soutenir le développement de la thérapie CAR-T. Cette liste croissante de protéines comprend de nombreux antigènes cibles marqués par fluorescence et des protéines pré-biotinylées qui conviennent uniquement à l'évaluation de l'expression des CAR. De plus, nous fournissons également des protéines difficiles à exprimer telles que BCMA, CD19, ROR1 et EGFRVIII.

Stratégie de détection des CAR et conception de produits
Méthode directe —Protéines marquées par fluorescence
Fluorescence-labeled Proteins
CARACTÉRISTIQUES CLÉS
Les antigènes cibles sont pré-marqués avec un colorant fluorescent.
La durée du processus peut être réduite par l'utilisation de protéines marquées directement.
La réaction non spécifique d'un anticorps secondaire est éliminée.
> Marqué PE (Cliquez sur la molécule pour afficher les détails du produit)-> Spécialement conçu
> Marqué FITC (Cliquez sur la molécule pour afficher les détails du produit)-> Spécialement conçu
> Case Study
Evaluation of Anti-CD19 CAR Expression with FITC-labeled CD19
CD19 CAR detection verified by FACS
293 cells were transfected with anti-CD19-scFv and RFP tag. 2e5 of the cells were stained with B. FITC-Labeled Human CD19 (20-291) (Cat. No. CD9-HF2H2, 10 µg/ml) and C. FITC-labeled protein control. A. Non-transfected 293 cells and C. FITC-labeled protein control were used as negative control. RFP was used to evaluate CAR (anti-CD19-scFv) expression and FITC was used to evaluate the binding activity of FITC-labeled Human CD19 (20-291) (Cat. No. CD9-HF2H2).
> Application —Évaluation de l’expression des CAR

Détection basée sur la biotine-streptavidine utilisant des protéines biotinylées

Biotinylated Proteins
CARACTÉRISTIQUES CLÉS
Les antigènes cibles sont pré-marqués avec de la biotine et détectés par la streptavidine marquée (le complexe biotine-avidine).
La streptavidine marquée avec des fluorochromes peut se lier à des protéines biotinylées avec un degré élevé d'affinité et de spécificité, amplifiant le signal et améliorant la sensibilité et la spécificité de détection.
> Protéines biotinylées -> Spécialement conçues
> Case Study
Evaluation of Anti-BCMA CAR Expression with Biotinylated BCMA
BCMA CAR detection verified by FACS
Human T cells were transfected with anti-BCMA CAR and cultured for 3 days. Three days post-transfection, 1e6 cells were first incubated with 50 µl biotinylated human BCMA protein (Cat. No. BC7-H82F0, 8 µg/ml), washed and then stained with PE Streptavidin and analyzed by flow cytometry. (Data are kindly provided by PREGENE Biopharma)
> Application —  Évaluation de l’expression des CAR

Détection indirecte à l'aide de protéines non conjuguées

Unconjugated Proteins
CARACTÉRISTIQUES CLÉS
Les antigènes cibles sont conçus pour porter un Tag spécifique et sont détectés à l'aide d'un anticorps secondaire (anticorps Tag anti-épitopique) marqué avec un fluorophore.
Une réaction non spécifique d'un anticorps secondaire peut se produire.
> Protéines non conjuguées -> Spécialement conçues
> Case Study
Evaluation of Anti-CD19 CAR Expression with Fc-fusion CD19
CD19 (Fc Tag  CAR detection verified by FACS
293 cells were transfected with FMC63-scFv and RFP tag. 2e5 of the cells were first stained with B. Human CD19 (20-291) Protein, Fc Tag, low endotoxin (Super affinity) (Cat. No. CD9-H5251 , 3 µg/ml) and C. Human Fc Tag Protein Control, followed by FITC-conjugated Anti-human IgG Fc Antibody. A. Non-transfected 293 cells and C. Human Fc Tag Protein Control were used as negative control. RFP was used to evaluate CAR (anti-CD19-scFv) expression and FITC was used to evaluate the binding activity of Human CD19 (20-291) Protein, Fc Tag, low endotoxin (Super affinity) (Cat. No. CD9-H5251).
> Application — Évaluation de l’expression des CAR

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