Un anticorps monoclonal spécifique aux CAR pour détecter l'expression des CAR anti-CD19

La CD19 est actuellement la cible la plus utilisée dans la thérapie CAR-T, dont l'efficacité et la sécurité ont été validées pour le traitement de la LLA-B, de la LLC et des lymphomes à cellules B. FMC63 est un anticorps monoclonal de souris IgG2a qui cible CD19. Jusqu'à présent, la plupart des essais CART19 rapportés contiennent le scFv anti-CD19 dérivé de FMC63, y compris les deux CARs approuvés par la FDA, Kymriah et Yescarta.

Si les résultats thérapeutiques obtenus avec les cellules CAR-T spécifiques de CD19 sont impressionnants, le contrôle de la qualité lors de la production de la thérapie reste un domaine dans lequel des progrès sont nécessaires. Nos protéines CD19 de haute affinité  peuvent détecter efficacement l'expression du CAR anti-CD19 à la surface des cellules T transduites et ont été largement reconnues pour leur haute sensibilité et spécificité. Ce protéines CD19 de haute affinité  ont été largement utilisées pour les tests de contrôle de la qualité et l'étude pharmacocinétique (PK) des cellules CAR-T anti-CD19 dans les essais cliniques.

Après avoir reçu des réactions positives sur les protéines CD19 de haute affinité sur le marché, ACROBiosystems a maintenant développé un anticorps anti-idiotypique contre le FMC63 scFv, appelé anticorps monoclonal anti-FMC63 scFv, qui peut reconnaître spécifiquement le domaine de reconnaissance de l'antigène des CAR anti-CD19 dérivés du FMC63 avec une sensibilité et une spécificité élevées. Les performances de l'anticorps monoclonal scFv anti-FMC63 ont été validées par cytométrie en flux (FCM) en interne et il est adapté à la détection des CAR anti-CD19 dérivés de FMC63 dans les essais cliniques.

À propos des anticorps anti-FMC63 de qualité Premium

Ils sont conçus pour des applications d'isolement et de culture de cellules et sont produits dans des conditions de fabrication sans composants d'origine animale. Aucun composant d'origine animale n'est utilisé dans le processus de production. Ils sont produits dans le cadre de notre système rigoureux de contrôle de la qualité qui comprend un ensemble complet de tests, notamment des tests de stérilité et d'endotoxine. Les performances des produits sont soigneusement validées et testées pour vérifier leur compatibilité avec les cultures cellulaires ou toute autre application au stade préclinique précoce.

Aucune coloration de fond lors de la détection des CAR anti-CD19 dérivés du FMC63 dans les essais cliniques

Detection of Anti-CD19 (FMC63) CAR Expression

2e5 of FMC63 scFv-based anti-CD19 CAR-293 cells were stained with 100 µL of the working solution of Monoclonal AntiFMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Cat. No. FM3-Y45) and isotype control respectively, washed and then followed by PE anti-mouse IgG1 Antibody and analyzed with flow cytometry (QC tested).

Protocol

Assessment of Non-specific Binding to 293 Cells

Non-specific binding of Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody (Cat. No. FM3-Y45) to non-transfected 293 cells was determined by flow cytometry. The data showed that Anti-FMC63 scFv Antibody didn’t bind to non-transfected 293 cells.

Protocol

Assessment of Non-specific Binding to PBMCs

Non-specific binding of Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody (Cat. No. FM3-Y45) to non-transfected human PBMCs was determined by flow cytometry. The data showed that Anti-FMC63 scFv Antibody didn’t bind to non-transfected human PBMCs.

Protocol

Reconnaissent spécifiquement le site de liaison à l'antigène des CAR dérivés du FMC63 avec une grande affinité

Binding Activity and Specificity Measured by ELISA

Immobilized FMC63 scFv, His Tag at 2 μg/mL (100 μL/well) can bind Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Clone Y45) with a linear range of 1-19 ng/mL. Anti-DNP antibody, mouse IgG1 (Cat. No. DNP-M1) was used as an isotype control (QC tested).

Protocol

Neutralizing Activity Measured by ELISA

ELISA analysis shows that the binding of Human CD19, Fc Tag (Cat. No. CD9-H5251) to FMC63 scFv, His Tag was inhibited by increasing concentration of Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Clone Y45). The concentration of Human CD19, Fc Tag used is 5 μg/mL (100 μL/well). The IC50 is 0.084 μg/mL (Routinely tested).

Protocol

High Affinity Determined by SPR

Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Cat. No. FM3-Y45) captured on CM5 chip via anti-mouse antibodies surface can bind FMC63 scFv with an affinity constant of 1.08 nM as determined in a SPR assay.

Protocol

Liste de produits des protéines CD19 de haute affinité

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