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> Facteurs de croissance pour la culture de cellules souches pluripotentes induites
Cancers 2022, 14, 2266
Cellule T CSPi
L'approche classique pour générer des cellules T dérivées de CSPi part de :
1. Co-culture de CSPi dérivées de donneurs sains avec une lignée de cellules stromales de moelle osseuse murine (C3H10T1/2 ou OP9) pour générer des cellules progénitrices hématopoïétiques CD34+.
2. Les progéniteurs hématopoïétiques sont enrichis et co-cultivés avec la lignée cellulaire OP9 qui surexprime DLL-1/DLL-4, avec des cytokines supplémentaires pour motiver la différenciation des cellules T.
cellule NK-CSPi
Générer des cellules NK dérivées d'e CSPi :
1. Les CSPi dérivées de donneurs sains sont cocultivées avec la lignée de cellules stromales de moelle osseuse murine M210-B4 pendant environ 20 jours pour permettre la génération de progéniteurs hématopoïétiques CD34 +.
2. Les progéniteurs hématopoïétiques CD34 + sont ensuite enrichis et cocultivés avec une monocouche de cellules stromales murines AFT024 (une lignée de cellules stromales dérivées du foie fœtal) ou EL08-1D2 avec des cytokines définies pendant 4 à 5 semaines, pour finalement générer des cellules NK matures.
Macrophage CSPi
La formation de macrophages Mφs dérivés de CSPi nécessite une méthodologie plus complexe :
1. La formation de corps embryoïdes (EBs) est la méthode la plus couramment utilisée pour différencier les Mφs dérivées des CSPi, en utilisant des modifications spécifiques telles que la suspension rotative, les approches par micropuits, les puces microfluidiques à goutte suspendue, et d'autres.
2. Après la formation des EB dérivées de CSPi, les Mφ myéloïdes sont induites par l'ajout de cytokines, notamment le GM-CSF, le M-CSF, l'IL-3 et l'IL-4.
Stérile
Sans composants d'origine animale
Haute Pureté ≥95%
Haute Bioactivité Vérifiée par Test Cellulaires
Qualités ActiveMax®, Premium et GMP disponibles
Faible taux d'endotoxine ≤0.1 EU/µg
Sans support
Similaire à la conformation et aux modifications naturelles
Cohérence entre les lots
Les cytokines sont des matières premières essentielles utilisées dans la culture de cellules pour les médicaments de thérapie cellulaire et génique (CGT). Habituellement, au stade préclinique, la sécurité et la qualité des matières premières ne sont pas prioritaires. Dans ce cas, il est possible d'utiliser des produits destinés à la recherche uniquement. Toutefois, lorsque l'on passe à des étapes ultérieures du développement d'un médicament, telles que les phases CMC ou cliniques, il est nécessaire de remplacer les matières premières par des matériaux de qualité GMP afin de se conformer aux directives réglementaires. Pendant cette période de transition, une quantité importante d'énergie est consacrée à la réévaluation et à la validation de nouvelles matières premières.
Pour faciliter la transition entre le développement préclinique et le stade clinique, nous proposons plusieurs catégories de cytokines dont la bioactivité a été évaluée comme étant presque identique, ainsi que la documentation requise pour les produits GMP. Nous recommandons l'utilisation de nos matières premières de qualité premium au stade précoce du développement afin d'assurer une transition sans heurts vers nos matières premières de qualité GMP lors de l'entrée en phase CMC ou clinique et de minimiser le nombre d'études de réévaluation et de validation réalisées.
GMP Human IL-15 Protein on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.
Human IL-2, premium grade on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.
Human DLL4 Protein, Fc Tag, premium grade on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.
Human VEGF165, premium grade (Cat. No. VE5-H4210) stimulates proliferation of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). The ED50 for this effect is 4.216-9.281 ng/mL.
Human IL-2, premium grade (Cat. No. IL2-H5215) stimulates proliferation of CTLL-2 cells. The EC50 for this effect is 1.996 ng/mL, corresponding to a specific activity of 5 ⅹ10^6 IU/mg, which is calibrated against Interleukin-2 (Human, rDNA derived) (2nd International Standard) (NIBSC code: 86/500).
Immobilized Human DLL4 Protein, Fc Tag, premium grade (Cat. No. DL4-H5259) at 1 μg/mL (100 μL/well) can bind Monoclonal Anti-Human DLL4 Antibody, Human IgG1 with a linear range of 1-16 ng/mL.
Laminin 521 (LA5-H5261) could maintain the stemness of iPSC. Immunofluorescent staining indicated that the iPSCs expressed high levels of pluripotency associated markers Sox2, TRA-1-60, SSEA4 and OCT4.
Laminin 511 (LA8-H5283) could maintain the stemness of iPSC. Immunofluorescent staining indicated that the iPSCs expressed high levels of pluripotency associated markers Sox2, TRA-1-60, SSEA4 and OCT4.
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