Leave message
Can’t find what you’re looking for?
Fill out this form to inquire about our custom protein services!
Inquire about our Custom Services >>
Limited Edition Golden Llama is here! Check out how you can get one. 
Limited Edition Golden Llama is here! Check out how you can get one.
Offering SPR-BLI Services - Proteins provided for free! Get your ComboX free sample to test now!
Time Limited Offer: Welcome Gift for New Customers ! Shipping Price Reduction for EU Regions
A-Z
> Service analytique de caractérisation de la qualité
Les macromolécules jouent un rôle essentiel dans la recherche et le développement thérapeutiques, englobant les médicaments thérapeutiques tels que les anticorps monoclonaux, les protéines recombinantes, les polypeptides, les conjugués anticorps-médicaments (ADC) et les anticorps bispécifiques. Contrairement aux médicaments à petites molécules dont la taille est inférieure à 1kDa, les macromolécules ont un poids moléculaire nettement plus élevé, de l'ordre de 10 à 1000kDa. En raison de cette taille, les sites de modification potentiels sont nombreux et les molécules peuvent facilement s'agréger en solution pour former des particules. Ainsi, la caractérisation de la qualité à différentes étapes du cycle de vie du médicament et du processus de production est essentielle pour garantir le succès de la recherche et du développement des médicaments et accélérer le calendrier de développement des médicaments.
Plusieurs éléments clés de la caractérisation des médicaments macromoléculaires comprennent le séquençage précis des acides aminés, la détermination du poids moléculaire, la stabilité et le degré de polymérisation. Parmi ces caractéristiques, la stabilité est l'un des principaux indicateurs permettant d'évaluer la qualité des préparations pharmaceutiques et constitue la principale base pour déterminer la durée de vie des préparations pharmaceutiques.
ACROBiosystems a construit une plate-forme de services de caractérisation et d'analyse de qualité basée sur SEC-MALS et UNcle. Notre plate-forme permet d'analyser la température de fusion (Tm) et la température d'agrégation (Tagg), la taille des particules, le poids moléculaire, le degré de polymérisation et la pureté. Les deux instruments consomment peu d'échantillons, ont un débit élevé et sont des méthodes de test sans étiquette. Grâce aux technologies dont nous disposons, notre plateforme répond aux besoins en matière de tests de l'ensemble du processus de recherche et développement de médicaments, du développement des procédés, du contrôle de la qualité des produits et autres.
| Principe de SEC-MALS |
|---|
| La chromatographie d'exclusion stérique (SEC) est une méthode chromatographique qui sépare les composants selon leur taille moléculaire. Des billes uniformément poreuses sont tassées dans une colonne chromatographique pour séparer un échantillon en fonction de sa taille moléculaire, et la pureté de la protéine est obtenue en fonction du spectre de séparation. Chaque composant séparé par SEC entre dans le dispositif de diffusion de lumière multi-angle (MALS), et la diffusion de lumière se produit lorsque le laser illumine chaque groupe. La MALS est une méthode de détection post-colonne qui mesure l'intensité de la lumière diffusée à plusieurs angles en même temps, et l'intensité est proportionnelle au carré de la masse molaire, de la concentration et de l'incrément de l'indice de réfraction. La combinaison SEC-MALS permet de calculer directement le poids moléculaire d'un analyte et de déterminer la forme d'agrégation d'une protéine. |
| Type d'échantillon |
|---|
※ Protéines recombinantes ※ Anticorps ※ Polypeptides (la colonne et la méthode doivent être fournies) |
| Principe d'UNcle |
|---|
| UNcle est une plateforme technologique qui permet de suivre l'état de repliement d'une protéine en détectant les changements de sa fluorescence endogène par fluorescence à pleine longueur d'onde. Cela détermine la Tm de stabilité de la protéine et reflète la stabilité thermique ou la stabilité chimique de la protéine. La diffusion statique de la lumière (SLS) permet de calculer la stabilité de l'agrégation des protéines. Au cours du processus de dénaturation des protéines, leur conformation s'ouvre progressivement et les points hydrophobes sont progressivement exposés. Lorsqu'un certain niveau (température) est atteint, les molécules de protéines commencent à s'agréger, ce qui entraîne une augmentation du signal de lumière diffusée, qui détermine la Tagg initiale de la protéine. La diffusion dynamique de la lumière (DLS) permet de calculer la taille des particules et leur distribution grâce à la fluctuation et à la fonction de corrélation de l'intensité lumineuse. |
| Type d'échantillon |
|---|
※ Détermination de Tm & Tagg : Protéines recombinantes, anticorps monoclonaux, anticorps bispécifiques, conjugué anticorps-médicament (ADC), virus adéno-associé (AAV), nanoparticule lipidique (LNP) ※ Détermination de la taille des particules : Illimité |
Détermination du poids moléculaire absolu Confirmation du degré de polymérisation Détermination Tm & Tagg Détermination de la taille et de la distribution des particulesSEC-MALS permet de déterminer la pureté et le degré de polymérisation de divers anticorps et protéines, tout en analysant la modification des complexes protéiques par mesure du poids moléculaire absolu.
UNcle permet d'effectuer le développement/optimisation/criblage des formules des préparations, l'évaluation de la stabilité thermique et le criblage des molécules de médicaments candidats (protéine recombinante, anticorps monoclonal, BsAb, ADC, AAV) en déterminant Tm & Tagg et la taille des particules.
Three known antibody drugs, OKT3, Herceptin, and Ipilimumab, were determined by SEC-MALS. The molecular weight of the three antibodies is within a close range of 150-160 kDa. SEC-MALS was performed on the peaks with the retention time,calculating a molecular weight of 161.6, 15, and 172.2 kDa for each peak. The calculated molecular weight by SEC-MALS were close to the expected theoretical molecular weight (Fig. 1).
SEC-MALS can be used to determine glycosylation, PEG-modified proteins, membrane proteins and other complex modifications.
The degree of polymerization and protein purity is a critical part of protein characterization. For example, the SARS-CoV-2 virus S-protein functions as a trimer, consisting of three identical molecules encoded by the same gene. The researchers found that the conformational form of the S protein is naturally unstable, even if it does not bind to the host cell receptor ACE2. Similarly, there are also spontaneous conformational changes from prefusion to postfusion, which poses a signficiant challenges for vaccine development and neutralizing antibody screening. Cat. No. SPN-C52H9 (SARS-CoV-2 S protein, His Tag, Super stable trimer (MALS & NS-EM verified).
Fig 3. SDS-PAGE identified the SARS-CoV-2 S protein under reduced conditions. His Tag, Super stable trimer (MALS & NS-EM verified) (Cat. No. SPN-C52H9 ) The purity is over 90%, and the molecular weight is about 550-660 kDa by SEC-MALS. The size and appearance of the SARS-CoV-2 trimer verified with NS-EM were like those reported in the published literature.
Candidate drug molecules can be screened based on their different initial conformations, which alters the calculated Tm values. As such, four different samples can be screened based on the calculated Tm.
Fig 4. A2829-180803F1 Bulk Tm is relatively low, and the initial BCM value is significantly lower than that of the other three samples. It is speculated that its initial conformation state is different from that of the other three samples. The Tm detection value is also different from the other three samples.
Réponse rapide, service personnalisé avec notre équipe de projet et suivi en temps réel des progrès expérimentaux.
Équipe technique professionnelle de R&D ayant une grande expérience des projets.
Méthodes expérimentales vérifiées et matures disponibles pour raccourcir le cycle expérimental.
Un scientifique d'ACROBiosystems répondra dans les 24 heures suivant la soumission.
Appelez-nous au : +1 800-810-0816 ou par courriel à services@acrobiosystems.com pour une consultation.
This web search service is supported by Google Inc.
