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Anticorps anti-idiotypiques

Contexte

Un idiotope est l'ensemble unique de déterminants antigéniques (épitopes) de la partie variable d'un anticorps. Un anticorps anti-idiotypique (Anti-ID) se lie à l'idiotope d'un autre anticorps, généralement un médicament anticorps, ce qui en fait un outil très puissant pour le développement de médicaments anticorps, en particulier pour les analyses d'immunogénicité et PK/PD.

Pour soutenir les analyses précliniques/cliniques d'immunogénicité et PK, ACROBiosystems a développé une série d'anticorps anti-idiotypiques de haute affinité. Notre pipeline couvre cinq cibles en vogue, dont adalim*mab, Ritux*mab, Cetux*mab, Trastuz*mab et Bevaciz*mab. Pour faciliter le processus de développement de médicaments, nous fournissons des protocoles de test qui peuvent être employés pour différents scénarios d'application.

Liste des Produits
Molecule Cat. No. Antigen Neutralizing Activity Application
Adalimu*ab ADB-Y19 Anti-Adalimu*ab Antibodies (AY19) Neutralizing Antibody ADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*ab BEB-Y10 Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY10) (MALS verified, recommended for PK/PD) Neutralizing Antibody PK bridging ELISA; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*ab BEB-Y12 Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY12) (recommended for neutralizing assay) Neutralizing Antibody ADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*ab BEB-Y9 Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY9) (recommended for ADA assay) Neutralizing Antibody ADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*ab BEB-BY13 Biotinylated Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY13) (recommended for PK/PD) Neutralizing Antibody PK bridging ELISA;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*ab CEB-Y27 Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY27) (recommended for ADA assay) Neutralizing Antibody ADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*ab CEB-Y31 Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY31) (Non-Neutralizing) Non-Neutralizing Antibody ADA assay; Indirect ELISA
Cetuxi*ab CEB-Y28 Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY28) Neutralizing Antibody ADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*ab CEB-BY31 Biotinylated Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY31) (recommended for PK/PD) Non-Neutralizing Antibody PK bridging ELISA; Indirect ELISA
Rituxi*ab RIB-Y36 Anti-Rituxi*ab Antibodies (AY36) (recommended for ADA assay) Neutralizing Antibody ADA assay;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Rituxi*ab RIB-Y37 Anti-Rituxi*ab Antibodies (AY37) (recommended for PK/PD) Neutralizing Antibody PK bridging ELISA;Neutralizing assay;Indirect ELISA
Rituxi*ab RIB-FY35c FITC-Labeled Anti-Rituxi*ab Antibodies, Mouse IgG1 Neutralizing Antibody ADA assay;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Trastuzu*ab TRB-Y5b Anti-Trastuzu*ab Antibodies (AY5b) (recommended for PK/PD) Non-Neutralizing Antibody Neutralizing Antibody
Trastuzu*ab TRB-Y1b Anti-Trastuzu*ab Antibodies (AY1b) (recommended for PK/PD) Neutralizing Antibody PK bridging ELISA; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Application
Test ADA - Un calibrateur parfait

Les protéines thérapeutiques telles que les anticorps monoclonaux sont actuellement essentielles dans le traitement du cancer, des maladies auto-immunes et d'autres maladies. Étant donné qu'une protéine a une caractéristique intrinsèque d'immunogénicité en raison de sa structure contenant des épitopes potentiels de cellules B et de cellules T, les protéines thérapeutiques ont le potentiel d'induire des anticorps anti-médicament (ADA) même si la protéine a la même séquence d'acides aminés que des protéines humaines endogènes. L'émergence d'ADA chez les patients peut potentiellement entraîner une perte d'efficacité et/ou des événements indésirables. Par conséquent, une évaluation des risques d'immunogénicité et des stratégies d'atténuation des risques sont nécessaires lors du développement de produits protéiques thérapeutiques.

Le développement en interne d'un anticorps mono/multiclonal comme contrôle positif pour les tests ADA prend énormément de temps. Pour résoudre ce problème, ACROBiosystems a développé une série d'étalons d'anticorps anti-médicaments pour les tests ADA.

Case 1 Anti-Ritux*mab Antibodies ( RIB-Y36)

Anti-Ritux*mab Antibodies bridging ELISA for Anti-Drug Antibody (ADA) assay development. Immobilized Ritux*mab at 1 µg/ml, added increasing concentrations of Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-Y36, 10% human serum) and then added biotinylated Ritux*mab at 2 µg/ml. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with a sensitivity of 9.7 ng/mL.

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Anti-Ritux*mab Antibodies bridging MSD for Anti-Drug Antibody (ADA) assay development. Added the mix solution (biotinylated Ritux*mab at 5 µg/mL, SULFO-Ritux*mab at 5Nµg/mL and increasing concentrations of Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-Y36, 100% human serum). Detection was performed using MSD Assay with a sensitivity of 0.97 ng/mL.

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Case 2 Anti-Adalim*mab Antibodies (ADB-Y19)

Anti-Adalim*mab Antibodies bridging ELISA for Anti-Drug Antibody (ADA) assay development. Immobilized adalim*mab at 1 µg/ml, add increasing concentrations of Anti-Adalim*mab Antibodies (Cat. No. ADB-Y19, 10% human serum) and then add biotinylated adalim*mab at 5 µg/ml. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with a sensitivity of 0.6 ng/mL.

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Measured by its neutralizing ability in a functional ELISA. Immobilized adalim*mab at 0.5 μg/mL (100 μL/well) can bind pre-mixed Anti-Adalim*mab Antibodies (Cat. No. ADB-Y19) and Biotinylated Human TNF-alpha (Cat. No. TNA-H82E3) with an inhibition rate of 100%.

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Test PK - Analyse quantitative des anticorps thérapeutiques dans une matrice

ELISA est la technologie la plus couramment utilisée pour l'analyse quantitative des anticorps thérapeutiques dans une matrice. Cela se fait souvent par ELISA indirect, ELISA par compétition, ELISA en sandwich ou ELISA en double antigène (bridging). Parmi celles-ci, l'ELISA en double antigène (bridging) est considérée comme la meilleure option, en raison de son faible bruit de fond non spécifique et de sa sensibilité élevée. Les données montrent que l'utilisation d'IgG anti-humain de chèvre comme anticorps secondaire entraîne un bruit de fond élevé en raison d'une liaison non spécifique, et nécessite donc une pré-dilution avant les analyses. À l'inverse, l'ELISA en double antigène (bridging) par des anticorps anti-idiotypiques utilise la streptavidine conjuguée à la HRP pour la détection secondaire, ce qui minimise les interférences de fond. ACROBiosystems a développé une série d'anticorps anti-idiotypiques qui sont utilisés pour le test ELISA en double antigène (bridging).

Comparison between anti-idiotypic capture ELISA and anti-idiotypic bridging ELISA for Ritux*mab detection in patient samples. Left: anti-idiotypic capture ELISA; Right: anti-idiotypic bridging ELISA.

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Detection of Ritux*mab by bridging ELISA in serum. Immobilized Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-Y37) at 2 μg/ml, added increasing concentrations of Ritux*mab (10% human serum) and then added biotinylated Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-BY35) at 1 μg/ml. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with a sensitivity of 1 ng/ml.

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Caractéristiques
Haute affinité
L'affinité mesure la force de l'interaction entre un antigène et un anticorps, qui peut être représentée comme KD. La plus faible valeur de KD représente l'affinité la plus forte. Nous avons mesuré l'affinité de tous les anticorps anti-idiotypes en utilisant la méthode SPR. Cet élément de données aide à prédire la sensibilité dans le développement du test.

Anti-Adalim*mab Antibodies (mouse IgG1, Cat. No. ADB-Y19) captured on CM5 chip via anti-mouse antibodies surface, can bind human adalim*mab with an affinity constant of 1.36 pM.

Haute spécificité
Nous nous sommes assurés de la spécificité de chaque produit d'anticorps anti-idiotype avant sa mise sur le marché.
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Demonstration of the specificity of Anti-Cetux*mab Antibodies (Cat. No. CEB-Y28) to the Cetux*mab.

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Haute stabilité
ACROBiosystems a effectué des tests de stabilité accélérés et des tests de gel-dégel pour garantir la stabilité de nos produits avant leur mise sur le marché.

Reconstituted Anti-Trastuz*mab Antibodies were diluted to 0.4 mg/ml, aliquoted and placed at 37°C. Aliquots were removed from 37°C at every time point and placed at 4°C along with the control. No significant loss of activity was observed.

Anti-Trastuz*mab Antibodies were subjected to the indicated number of freeze-thaw cycles (FT). No significant loss of activity was observed.

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